离心机 - 离心机的工作原理
离心机是一种利用离心力对混合物进行分离的装置,其核心原理基于离心力场作用。以下是其工作原理的详细说明:
1. 基本原理:离心力模拟重力
离心力是物体在旋转时受到的向外的惯性力,其大小与旋转半径、角速度平方成正比。离心机通过高速旋转产生远大于重力的离心力(可达重力的数千至百万倍),从而加速混合物中不同密度或粒径组分的分离。
公式:
F=m⋅ ω2
⋅r
其中 为离心力, 为颗粒质量, 为角速度, 为旋转半径。
2. 分离过程
1. 样品装载:
将待分离的混合物(如细胞悬液、血液、蛋白质溶液等)置于离心管中,对称放入转子的样品槽内,确保转子平衡。
2. 高速旋转:
转子在电机驱动下高速旋转,产生强大的离心力场。混合物中的颗粒(细胞、蛋白质、沉淀物等)在离心力作用下沿径向向外运动。
3. 沉降分离:
密度差异分离:密度较大的颗粒沉降更快,逐步沉积到离心管底部;密度较小的组分留在上层。例如,血液离心后分为血浆(上清液)和血细胞(沉淀)。
粒径差异分离:在差速离心中,通过调整转速和时间,可逐步分离不同大小的颗粒(如细胞器分级分离)。
4. 分离结束:
停机后,混合物分层明显,可通过倾倒、移液等方式收集目标组分。
3. 关键参数
转速(RPM):每分钟转数,影响离心力大小。
相对离心力(RCF):以重力加速度(g)为单位,更能准确反映分离效果。计算公式:
RCF = 1.118 × 10-5 .r. (RPM)2 。
时间:根据样品性质调整离心时间。
温度:某些样品需控温(如冷冻离心机)防止变性。
4. 离心机类型与应用
低速离心机(< 10,000 RPM):用于细胞、大颗粒沉淀。
高速离心机(10,000–30,000 RPM):用于微生物细胞、细胞器。
超速离心机(> 30,000 RPM):用于蛋白质、核酸、病毒等亚细胞组分分离。
制备型与分析型:前者用于分离纯化样品,后者可测量颗粒物理性质(如沉降系数)。
5. 应用领域
生物学/医学:分离血液成分、提取DNA/RNA、纯化病毒。
化学/工业:分离胶体、废水处理、铀浓缩(气体离心机)。
日常生活:洗衣机脱水、乳制品脱脂、蜂蜜分离等。
6. 注意事项
平衡装载:样品需对称放置,防止转子失衡损坏设备。
选择适配转子与离心管:不同转子有最大转速限制。
生物安全:若分离病原体,需使用密封离心管并在安全柜中操作。
简单比喻
就像用绳子旋转一个装有沙石的水桶,沙子(重颗粒)会紧贴桶底,而水(轻组分)留在内侧。离心机通过更快速、可控的旋转,实现对微小颗粒的高效分离。
离心机技术的核心是利用离心力放大沉降效应,从而快速分离传统重力无法处理的微小或密度接近的组分。
